做醫(yī)療器械注冊(cè)的，特別是體外診斷試劑這塊，經(jīng)常碰到臨床評(píng)價(jià)的難題。今天聊的這個(gè)情況就很典型：你想拿一個(gè)已經(jīng)上市的產(chǎn)品（對(duì)比試劑）來(lái)證明你家新研發(fā)的試劑（考核試劑）性能不錯(cuò)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，人家對(duì)比試劑能測(cè)的濃度范圍（線性范圍）比你家的窄。你家試劑能測(cè)到很高的濃度，但對(duì)比試劑測(cè)這么高可能就不準(zhǔn)了或者直接測(cè)不出來(lái)了。這時(shí)候，有人就想，那把樣本稀釋一下再讓對(duì)比試劑測(cè)，不就能比了嗎？聽起來(lái)好像是個(gè)辦法，但這個(gè)操作到底行不行？

第一步：搞明白“線性范圍”和為啥要對(duì)比

簡(jiǎn)單說(shuō)，“線性范圍”就是這個(gè)試劑能準(zhǔn)確測(cè)量的濃度范圍。在這個(gè)范圍內(nèi)，濃度和檢測(cè)信號(hào)是成比例的，結(jié)果才可靠。臨床評(píng)價(jià)拿對(duì)比試劑來(lái)比，就是想看看你家新試劑測(cè)出來(lái)的結(jié)果，跟一個(gè)大家公認(rèn)靠譜的試劑測(cè)出來(lái)的結(jié)果是不是一致，證明你家試劑也挺準(zhǔn)的。

現(xiàn)在的問題是，對(duì)比試劑的“尺子”不夠長(zhǎng)，量不了你家試劑能量的最高點(diǎn)。這時(shí)候稀釋樣本，就相當(dāng)于把高濃度的樣本“沖淡”一點(diǎn)，讓它落到對(duì)比試劑的“尺子”能量準(zhǔn)的范圍內(nèi)，然后再測(cè)。測(cè)出來(lái)的結(jié)果，再乘以稀釋倍數(shù)，換算回原來(lái)的濃度，跟你家試劑直接測(cè)的結(jié)果去比。

第二步：能不能稀釋，關(guān)鍵看說(shuō)明書

這個(gè)稀釋的點(diǎn)子，到底能不能用？最直接、最關(guān)鍵的答案在這里：看對(duì)比試劑自己的說(shuō)明書！

（1）說(shuō)明書說(shuō)“行”，那可以考慮。如果對(duì)比試劑的生產(chǎn)廠家白紙黑字寫在說(shuō)明書里，說(shuō)他們的產(chǎn)品在某個(gè)濃度以上，可以用某種特定的方法（比如用特定的稀釋液，按某個(gè)倍比方式）稀釋樣本后再測(cè)，并且測(cè)出來(lái)的結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)后是有效的，那這個(gè)操作就有依據(jù)了。這種情況下，你按照人家說(shuō)明書規(guī)定的方法去稀釋、去測(cè)、去換算，理論上是可以用來(lái)跟考核試劑做比對(duì)的。

（2）說(shuō)明書沒說(shuō)或者明確說(shuō)“不行”，那千萬(wàn)別硬來(lái)。如果說(shuō)明書壓根沒提稀釋這回事，或者明確寫了樣本不能稀釋、稀釋后結(jié)果無(wú)效之類的，那你要是自己動(dòng)手稀釋了，測(cè)出來(lái)的結(jié)果就完全沒譜了。這結(jié)果再拿來(lái)跟考核試劑比，一點(diǎn)說(shuō)服力都沒有，審評(píng)老師肯定不會(huì)認(rèn)的。為啥呢？因?yàn)閺S家沒驗(yàn)證過(guò)稀釋后的性能，你這么做等于是在用人家沒認(rèn)可、沒保證的操作方式，結(jié)果當(dāng)然不可信。

第三步：稀釋操作可不是那么簡(jiǎn)單

就算說(shuō)明書允許稀釋，這事也沒那么簡(jiǎn)單。稀釋會(huì)引入一堆新問題：

1.稀釋液選啥？你用啥液體來(lái)稀釋樣本？生理鹽水？專用稀釋液？還是其他的？不同的稀釋液可能對(duì)樣本里的待測(cè)物質(zhì)有影響，比如會(huì)不會(huì)破壞它？會(huì)不會(huì)干擾檢測(cè)反應(yīng)？這都得按說(shuō)明書來(lái)，說(shuō)明書說(shuō)用啥就用啥。

2.稀釋倍數(shù)怎么定？說(shuō)明書通常會(huì)規(guī)定最大可稀釋倍數(shù)。比如，只能稀釋2倍、5倍或者10倍。你不能為了硬要測(cè)一個(gè)特別高的濃度，就自作主張稀釋個(gè)幾十上百倍。稀釋倍數(shù)越大，樣本被“沖”得越淡，誤差放大的倍數(shù)也越大，結(jié)果可能就越不準(zhǔn)。必須嚴(yán)格遵守說(shuō)明書允許的最大倍數(shù)。

3.操作誤差變大了。稀釋本身就是一個(gè)操作步驟。加多少樣本，加多少稀釋液，混勻得好不好，每一步都可能帶來(lái)誤差。本來(lái)直接測(cè)可能挺準(zhǔn)的，一稀釋，操作上的小誤差就被放大了（乘以稀釋倍數(shù)），最終結(jié)果的可靠性就下降了。

4.稀釋后性能還一樣嗎？說(shuō)明書說(shuō)稀釋后結(jié)果有效，那也是廠家在自己驗(yàn)證過(guò)的條件下得出的結(jié)論。你稀釋后，樣本的基質(zhì)（就是樣本的整體環(huán)境）變了，對(duì)比試劑在稀釋后的樣本基質(zhì)里是不是還能保持原來(lái)的準(zhǔn)確度、精密度？這個(gè)其實(shí)是有疑問的。稀釋本身就可能帶來(lái)所謂的“基質(zhì)效應(yīng)”。

5.考核試劑那邊咋辦？你稀釋了樣本給對(duì)比試劑測(cè)，那考核試劑呢？是測(cè)稀釋前的原樣，還是測(cè)稀釋后的樣本？如果考核試劑也測(cè)稀釋后的樣本，那比較的是稀釋后的結(jié)果一致性。如果考核試劑測(cè)原樣，對(duì)比試劑測(cè)稀釋換算后的結(jié)果，這相當(dāng)于在比較兩個(gè)不同處理流程下的結(jié)果，可比性就更復(fù)雜了。方案設(shè)計(jì)要特別清楚這點(diǎn)。

第四步：開發(fā)階段就要想清楚

其實(shí)啊，碰到對(duì)比試劑線性范圍不夠用的情況，回過(guò)頭來(lái)想想，在研發(fā)你家考核試劑的時(shí)候，是不是非得把線性范圍做那么寬？

（1）臨床實(shí)際需要多寬？醫(yī)生看病，診斷疾病，真正需要檢測(cè)的濃度范圍到底是多大？你把范圍做太寬了，可能超出實(shí)際臨床需求，不僅增加研發(fā)難度和成本，還讓穩(wěn)定性變得更難控制。

（2）范圍太寬反成負(fù)擔(dān)。追求過(guò)寬的線性范圍，可能在臨床評(píng)價(jià)時(shí)給自己挖坑，就像現(xiàn)在遇到的這個(gè)稀釋難題。而且范圍太寬，日常使用中碰到極端高值的機(jī)會(huì)很少，反而增加了產(chǎn)品不必要的復(fù)雜性和潛在風(fēng)險(xiǎn)。

所以，在設(shè)計(jì)考核試劑的線性范圍時(shí)，一定要緊密結(jié)合臨床應(yīng)用的實(shí)際需求，夠用就好，別盲目貪寬。

總結(jié)一下

回到最初的問題：臨床評(píng)價(jià)時(shí)對(duì)比試劑的線性范圍無(wú)法覆蓋考核試劑，可以倍比稀釋后進(jìn)行比對(duì)嗎？

（1）核心前提：對(duì)比試劑說(shuō)明書必須明確允許樣本稀釋，并且說(shuō)明了稀釋方法和最大稀釋倍數(shù)。這是硬性條件，沒得商量。

（2）操作要規(guī)范：必須嚴(yán)格按照說(shuō)明書的要求來(lái)選稀釋液、定稀釋倍數(shù)、進(jìn)行操作。

（3）風(fēng)險(xiǎn)要知道：稀釋會(huì)引入額外的操作誤差和基質(zhì)效應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)，可能影響結(jié)果可比性和評(píng)價(jià)的可靠性。

（4）方案要寫清：臨床評(píng)價(jià)方案里必須詳細(xì)描述稀釋操作流程、結(jié)果換算方法、以及為什么認(rèn)為這樣操作后得到的結(jié)果仍然有效、可比。

（5）根源要反思：在考核試劑開發(fā)階段，就應(yīng)該基于臨床實(shí)際需求合理設(shè)定線性范圍，避免范圍過(guò)寬帶來(lái)后續(xù)評(píng)價(jià)困難。

說(shuō)白了，稀釋這個(gè)辦法，在滿足特定條件（說(shuō)明書允許）時(shí)，理論上是一條“出路”，但它絕不是個(gè)省心省力的好辦法，會(huì)帶來(lái)一堆技術(shù)挑戰(zhàn)和審評(píng)上的疑問。能不用盡量別用，真要用，必須把依據(jù)做足，操作做規(guī)范，風(fēng)險(xiǎn)考慮周全。思途CRO在幫客戶處理這類項(xiàng)目時(shí)，都會(huì)特別強(qiáng)調(diào)這些關(guān)鍵點(diǎn)。大家在做臨床評(píng)價(jià)方案設(shè)計(jì)前，一定要把對(duì)比試劑的說(shuō)明書吃透！